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国内种猪场猪支原体肺炎流行病学调研

作者:佚名来源:养猪杂志时间:2016-10-12 10:31点击:

  猪支原体肺炎在我国广泛流行,为查清该病在山西省流行情况,对部分种猪场和散养户进行了流行病学调研,证实猪群咳嗽、气喘现象较为普遍;对疑似病猪、死猪采集病料,用PCR试剂盒检测猪肺炎支原体病原阳性率为26%以上;对非免疫猪群抽检血样,用ELISA试剂盒检测猪肺炎支原体血清抗体阳性率为36.7%以上。以上调研证明,山西种猪场猪支原体肺炎感染较为严重,与临床调查结果基本相符。可能与山西昼夜温差大,养猪户只重视保温、不重视通风,绝大多数养猪户不接种猪肺炎支原体疫苗有一定关系。为今后山西省防治该病提供了重要依据。

  猪支原体肺炎(MPS)是由猪肺炎支原体(MH)引起的猪的一种慢性、接触性呼吸道传染病,以咳嗽、气喘、生长缓慢为特征,在世界范围内广泛流行,主要通过鼻腔接触和空气传播。病猪表现为咳嗽和气喘,肺部肉样或肝样病变。患有该病的慢性病猪,易诱发其它呼吸道疾病,增加病死率,并且该病一旦传入猪群,很难彻底清除。病猪日增重降低约17.4%,饲料转化率降低约14%。在德国汉堡召开的第18届IPVS(世界猪病大会)上发表的资料表明,猪肺炎支原体是猪呼吸道病综合征(PRDC)的主要病原体之一,阳性率达82.5%。山西昼夜温差大,环境污染严重,饲养条件不好,使该病成为常见病、多发病,严重危害养猪业的发展。本病是高发病低死亡,其防治不被养猪业者重视。笔者于对猪支原体肺炎在山西省的流行情况进行了流行病学调研,现将结果总结如下。

  1、材料与方法

  1.1流行病学调查方法

  笔者对太原、晋中、阳泉、长治、忻州、原平等地市10个饲养100头母猪以上规模的种猪场、饲养30头母猪以下规模的散养户、门诊病例及3个屠宰场进行调研。调研内容:没有免疫过猪肺炎支原体疫苗的猪群是否有咳嗽、气喘、生长速度降低症状及屠宰后肺部病变,对疑似感染猪及屠宰时肺部有病变的猪采集病料检测病原,对非免疫猪群采集血样

  检测抗体,并做好详细记录。

  1.2病原、抗体检测材料及检测方法

  1.2.1检测材料对有呼吸道症状的疑似感染猪肺炎支原体母猪、仔猪、肥育猪每头活体采血5 mL,用鼻拭子采集呼吸道分泌物;对屠宰场和门诊病例肺部有病变的猪采集支气管和有病变的肺部组织,用咽拭子采集呼吸道分泌物,放-70℃冰箱保存备用。对非免疫猪每头采血3-5 mL。

  1.2.2检测试剂猪肺炎支原体PCR检测试剂盒与猪肺炎支原体血清抗体ELISA检测试剂盒由北京索奥生物医药科技有限公司提供。

  1.2.3实验仪器PCR仪、低温高速冷冻离心机、电泳仪、紫外线凝胶成像仪、酶标仪、洗板机等。

  1.2.4病原检测方法按照猪肺炎支原体PCR检测试剂盒的操作步骤进行:样品处理(组织样品处理、全血样品处理、阳性对照处理、阴性对照处理)→DNA的提取→PCR扩增→电泳→凝胶成像→拍照→结果判定。紫外线灯下观察,在阳性对照出现187 bp扩增条带、阴性对照无条带出现时,实验结果成立。被检样品出现187 bp扩增条带为猪肺炎支原体阳性,否则为阴性。

  1.2.5抗体检测方法按照猪肺炎支原体血清抗体ELISA检测试剂盒操作步骤进行:全血样品处理→稀释血清→加样→洗板→加酶结合物→洗板→显色→终止→酶标仪判定。空白孔调零,在酶标仪上测各孔的OD630值。若样品OD630≥0.42,判为阳性;若样品OD630<0.38,判为阴性;若样品0.38≤OD630<0.42,判为可疑,建议重新检测,若重复检测结果仍在0.38~0.42,判为阳性。

  2、结果

  2.1流行病学调研情况

  2.1.1流行特点笔者调查发现,该病一年四季均可发生,但寒冷、气候多变的季节多发;塑料大棚饲养、10-35 kg的仔猪多发;饲养管理不善、卫生条件差、饲养密度大、通风换气不好的猪场多发。仔猪感染后可发生死亡,肥育猪多为慢性或隐性。病原体随猪咳嗽、喷嚏及分泌物排出体外,主要通过呼吸道感染健康猪,该病可长期在猪群中流行。猪群发病以慢性型为主,有呼吸道症状的猪占猪群总数的30%以上。

  2.1.2临床症状急性型表现突然发病,呼吸加快,张口喘气,发出拉风箱似的喘鸣声,口鼻流出带泡沫的分泌物,一般体温没有变化。慢性型表现体温不高,咳嗽,次数逐渐增多,尤其在早晨活动后和采食时连续咳嗽,咳嗽时站立不动、低头、伸颈、弓背,直到把分泌物咳出为止;严重的精神萎靡,采食量下降,行动无力,可视黏膜发绀,呼吸困难,有明显的腹

  式呼吸,呼吸快而用力,张口喘气,病猪消瘦、生长缓慢。如果混合感染或继发感染猪蓝耳病、猪传染性胸膜肺炎等,则体温升高。

  2.1.3病理变化尸体剖检眼观病变主要在肺部。急性病例肺高度膨大,被膜紧张,几乎充满整个胸腔,有程度不同的水肿、气肿,并且为灰白、灰红、橘红色;病变部位切面湿润、致密、膨胀,挤压时小支气管流出灰白色带泡沫的液体。慢性病例,两侧肺的心叶、尖叶、中间叶呈对称性的外观似鲜肉样、胰样、虾肉样的病变,与健康组织界限明显,对称性典型病

  变猪占50%左右;从小支气管可挤压出灰白色带泡沫的浆液或混浊黏稠的液体,肺门淋巴结、支气管淋巴结和纵隔淋巴结肿大,呈灰白色,切面外翻湿润。继发感染链球菌病、副猪嗜血杆菌病时可见关节炎、脑炎、心包炎、胸膜炎和腹膜炎等。继发感染猪蓝耳病时肺小叶间质增宽,呈明显的弥漫性、间质性肺炎。继发感染猪传染性胸膜肺炎时可见化脓性肺炎。对3个屠宰场屠宰的2 600头猪的肺部进行肉眼观察,有病变的猪为1 196头,占46%,其中有对称性病变的猪为813头,占肺部有病变猪的68%,占总数的31.3%。

  2.2猪肺炎支原体病原、抗体检测结果

  2.2.1病原检测结果疑似病猪、死猪的血清、鼻咽拭子、肺组织的猪肺炎支原体病原检测结果见表1

  表1猪肺炎支原体病原阳性率%

  注:血清、鼻拭子基本上采自同一头调查猪场和门诊病例的疑似病猪;鼻咽拭子以鼻拭子为主,咽拭子从活体中不易采集,是从病死猪中采集的;野猪是从2个发生呼吸道病的野猪场的6头病死猪体采集的。

  2.2.2血清抗体检测结果未免疫猪肺炎支原体疫苗猪场的母猪、仔猪(10-35 kg)、肥育猪(35 kg后)的猪肺炎支原体血清抗体检测结果见表2。

  表2猪肺炎支原体血清抗体阳性率%

  3小结与讨论

  (1)猪肺炎支原体病原、抗体检测结果表明,山西种猪场猪支原体肺炎感染较为严重,与临床调查结果基本相符。可能与山西昼夜温差大,养猪户只重视保温、不重视通风,绝大多数养猪户不接种猪肺炎支原体疫苗有一定关系,为今后山西省防制该病提供了有力的依据。

  (2)试验证明,即使猪群感染了猪支原体肺炎,在血清中基本上检测不出其病原体,在鼻咽拭子中可以检测出病原体,但没有血清抗体阳性率高,这可能与病料的采集时间(感染期后)有关;有肺部病变病料的病原阳性率比用鼻咽拭子采集的病料高出10个百分点。对非免疫猪场,采用ELISA试剂盒检测猪肺炎支原体血清抗体能够较客观地反映猪群的实际感染情况。因此,对免疫猪场采用鼻咽拭子活体采集病料、病死猪采集肺部病变组织检测病原体,对非免疫猪群采血检测抗体,可作为诊断感染猪肺炎支原体的依据。

  (3)猪肺炎支原体定植于上呼吸道纤毛,导致纤毛功能降低,不能有效清除呼吸道中的碎片及侵入的病原菌,并且猪肺炎支原体和其它细菌协同感染导致地方性肺炎的发生。因此猪群经常出现并发感染或混合感染,给养猪业造成了严重的经济损失,应引起养猪户的高度重视,应采取接种疫苗、改善饲养条件、加强饲养管理等综合性防控措施严防本病的发生。

责任编辑:牛海利  



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